4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS:200422-18-0

Epekto: Ang ONPG ay isang substrate na partikular na ginagamit upang makita ang presensya at aktibidad ng enzyme β-galactosidase.Kapag naroroon at aktibo ang β-galactosidase enzyme, hinahati nito ang ONPG sa dalawang produkto: o-nitrophenol at isang galactose derivative.Ang pagpapalaya ng o-nitrophenol ay nagreresulta sa isang dilaw na pagbabago ng kulay, na maaaring masukat gamit ang isang spectrophotometer.

Application: Ang ONPG ay may ilang mga aplikasyon sa molecular biology at biochemistry research:

Pagpapasiya ng aktibidad ng β-galactosidase: Ang ONPG ay karaniwang ginagamit upang sukatin at i-quantify ang aktibidad ng β-galactosidase enzyme.Ang rate ng pagbuo ng o-nitrophenol, na direktang proporsyonal sa aktibidad ng enzyme, ay maaaring masukat sa spectrophotometrically.

Pagpapahayag at regulasyon ng gene: Ang ONPG ay kadalasang ginagamit sa mga eksperimento na nauugnay sa pagpapahayag ng gene at mga pag-aaral sa regulasyon.Ito ay madalas na ginagamit sa fusion protein assays, tulad ng karaniwang ginagamit na lacZ fusion system, upang pag-aralan ang pagpapahayag ng mga gene sa ilalim ng kontrol ng mga partikular na promoter.Ang aktibidad ng beta-galactosidase na sinusukat gamit ang ONPG ay nagbibigay ng mga insight sa antas ng pagpapahayag ng gene.

Pag-screen para sa aktibidad ng β-galactosidase: Maaaring gamitin ang ONPG bilang isang colorimetric na paraan ng screening sa recombinant DNA technology upang matukoy ang presensya at functionality ng LacZ gene, na nag-encode ng β-galactosidase.Nakakatulong ang paraan ng screening na ito sa pagtukoy ng mga clone na naglalaman ng gene ng interes.

Enzyme kinetics studies: Ang ONPG ay kapaki-pakinabang din sa pag-aaral ng kinetics ng β-galactosidase enzyme.Sa pamamagitan ng pagsukat ng rate ng reaksyon ng enzyme-substrate sa iba't ibang konsentrasyon ng substrate, posibleng matukoy ang mga kinetic na parameter tulad ng Michaelis-Menten constants (Km) at maximum na rate ng reaksyon (Vmax).