IPTG CAS:367-93-1 Presyo ng Tagagawa
Ang Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) ay isang sintetikong analog ng lactose na karaniwang ginagamit sa molecular biology research at biotechnology application.Pangunahing ginagamit ang IPTG upang himukin ang pagpapahayag ng mga gene sa mga bacterial system, kung saan ito ay nagsisilbing molecular trigger upang simulan ang transkripsyon ng mga target na gene.
Kapag idinagdag sa daluyan ng paglago, ang IPTG ay kinukuha ng bakterya at maaaring magbigkis sa lac repressor protein, na pumipigil sa pagharang nito sa aktibidad ng lac operon.Ang lac operon ay isang kumpol ng mga gene na kasangkot sa lactose metabolism, at kapag ang repressor protein ay inalis, ang mga gene ay ipinahayag.
Ang IPTG ay kadalasang ginagamit kasabay ng lacUV5 mutant promoter, na isang aktibong bersyon ng lac promoter.Sa pamamagitan ng pagsasama ng IPTG induction sa mutant promoter na ito, makakamit ng mga mananaliksik ang mataas na antas ng pagpapahayag ng gene.Nagbibigay-daan ito para sa paggawa ng malalaking dami ng protina para sa paglilinis o iba pang mga aplikasyon sa ibaba ng agos.
Bilang karagdagan sa pagpapahayag ng gene, ang IPTG ay madalas ding ginagamit sa asul/puting screening assays.Sa pamamaraang ito, ang lacZ gene ay karaniwang pinagsama sa isang gene ng interes, at ang bakterya na matagumpay na nagpapahayag ng fusion gene na ito ay bubuo ng isang aktibong β-galactosidase enzyme.Kapag ang IPTG ay idinagdag kasama ng isang chromogenic substrate tulad ng X-gal, ang bakterya na nagpapahayag ng fusion gene ay nagiging asul dahil sa aktibidad ng β-galactosidase.Ito ay nagbibigay-daan para sa pagkilala at pagpili ng mga recombinant strain na matagumpay na naisama ang gene ng interes.
Induction ng expression ng gene: Ang IPTG ay karaniwang ginagamit upang himukin ang pagpapahayag ng mga target na gene sa mga bacterial system.Ginagaya nito ang natural na inducer lactose at nagbubuklod sa lac repressor protein, na pinipigilan itong humarang sa lac operon.Ito ay nagbibigay-daan para sa transkripsyon at pagpapahayag ng nais na mga gene.
Pagpapahayag at pagdalisay ng protina: Ang IPTG induction ay kadalasang ginagamit upang makagawa ng malalaking dami ng mga recombinant na protina para sa iba't ibang layunin, gaya ng biochemical studies, therapeutic production, o structural analysis.Sa pamamagitan ng paggamit ng naaangkop na expression vectors at IPTG induction, makakamit ng mga mananaliksik ang mataas na antas ng target na produksyon ng protina sa mga bacterial host.
Blue/white screening: Ang IPTG ay madalas na ginagamit kasama ng lacZ gene at isang chromogenic substrate, gaya ng X-gal, para sa blue/white screening assays.Ang lacZ gene ay karaniwang pinagsama sa gene ng interes, at ang bakterya na matagumpay na nagpapahayag ng fusion gene na ito ay bubuo ng isang aktibong β-galactosidase enzyme.Kapag ang IPTG at ang chromogenic substrate ay idinagdag, ang mga recombinant na strain na nagpapahayag ng fusion gene ay nagiging asul, na nagbibigay-daan para sa madaling pagkilala at pagpili.
Pag-aaral ng regulasyon ng gene: Ang IPTG induction ay karaniwang ginagamit sa pananaliksik upang pag-aralan ang regulasyon ng mga gene at operon, partikular ang lac operon.Sa pamamagitan ng pagmamanipula sa mga konsentrasyon ng IPTG at pagsubaybay sa pagpapahayag ng mga bahagi ng lac operon, maaaring siyasatin ng mga mananaliksik ang mga mekanismo ng regulasyon ng gene at ang papel ng iba't ibang mga kadahilanan o mutasyon.
Mga sistema ng pagpapahayag ng gene: Ang IPTG ay isang mahalagang bahagi sa ilang mga sistema ng pagpapahayag ng gene, tulad ng mga sistemang nakabatay sa promoter ng T7.Sa mga sistemang ito, ang lac promoter ay kadalasang ginagamit upang himukin ang pagpapahayag ng T7 RNA polymerase, na, naman, ay nagsasalin ng mga target na gene sa ilalim ng kontrol ng mga sequence ng T7 promoter.Ginagamit ang IPTG upang mapukaw ang pagpapahayag ng T7 RNA polymerase, na humahantong sa pag-activate ng pagpapahayag ng target na gene.
| Komposisyon | C9H18O5S |
| Pagsusuri | 99% |
| Hitsura | Puting pulbos |
| Cas No. | 367-93-1 |
| Pag-iimpake | Maliit at maramihan |
| Shelf Life | 2 taon |
| Imbakan | Mag-imbak sa malamig at tuyo na lugar |
| Sertipikasyon | ISO. |
